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据《佛说观药王药上二菩萨经》（宋西域三藏畺良耶舍（宋言时称）译）中，药王菩萨与药上菩萨本是一对兄弟，一名星宿光，一名电光明，星宿光长者在过去世琉璃光照如来像法时期，因听闻日藏比丘广赞大乘菩萨本缘，演说如来无上清净平等大慧，心生欢喜如闻甘露药，因此而以各种雪山良药供养诸比丘众，发菩提心，作菩萨愿，电光明长者亦心生随喜，效学兄长，众僧服良药已得闻妙法，以药力故除去四大增损及烦恼嗔恚二种病，因此药故大众皆发阿耨多罗三藐三菩提心，于未来世悉当成佛。释迦牟尼佛知道以后，还告诉弥勒菩萨说：“这位药王菩萨久修梵行，诸愿已满，将在未来世成佛，号净眼如来；药上菩萨也将在药王之后成佛，号净藏如来。”。《观药王药上两菩萨经》详细记载了药王和药上菩萨的观修功德，陀罗尼、本生传记，及著名的称说过去五十三佛名忏悔灭罪法。 另据《妙法莲华经》（姚秦鸠摩罗什译）的《药王菩萨本事品》和《正法华经》（西晋竺法护译）的《药王菩萨品》亦记载了药王菩萨舍身布施无量，得闻、受持妙法莲华经的故事。法华经中记载如果以七宝满三千大千世界，供养于佛及大菩萨、辟支佛、阿罗汉，此人所得功德，不如受持一四句偈法华经为多。《妙法莲华经》的《法师品》中，如来向药王菩萨详细讲述了听闻、读诵、受持、供养、演说妙法莲华经的功德：“药王，其有读诵法华经者，当知是人以佛庄严而自庄严，则为如来肩所荷担。其所至方，应随向礼，一心合掌，恭敬、供养、尊重、赞叹，华、香、璎珞、末香、涂香、烧香、缯盖、幢幡、衣服、肴馔，作诸伎乐，人中上供而供养之，应持天宝而以散之，天上宝聚应以奉献。所以者何？是人欢喜说法，须臾闻之，即得究竟阿耨多罗三藐三菩提故。”
又法华经卷六药王菩萨本事品载，过去无量恒河沙劫，有日月净明德如来，其佛寿命为四万二千劫。时有一菩萨，名‘一切众生喜见菩萨’，修习苦行，精进经行，一心求佛，经一万二千岁，证得‘现一切身色三昧’，乃服诸香，饮香油，燃自身供养佛一千二百年。命终后复化生于净德王之家，受日月净明德如来之付嘱，于彼佛灭度后造八万四千塔。其自身亦于七万二千年间，燃臂供养其塔。彼‘一切众生喜见菩萨’即今之药王菩萨。
另据法华经卷七妙庄严王本事品载，于过去无数劫，有云雷音宿王华智佛，说法华经。时有国王名妙庄严（梵Śubha -vyūha ），夫人名净德（梵Vimala -datta ），二子名净藏、净眼。其王邪见炽盛，信外道之法。夫人与二子乃共设种种方便，使王至宿王华智佛所，听闻法华经，共得利益。净藏、净眼二人即今药王、药上二菩萨。
另据《楞严经》载，药王、药上两位菩萨是从味尘而开悟：“药王、药上二法王子，并在会中五百梵天，即从座起，顶礼佛足，而白佛言：我无始劫，为世良医，口中尝此娑婆世界草木金石，名数凡有十万八千。如是悉知，苦酢咸淡甘辛等味，并诸和合俱生变异，是冷是热，有毒无毒，悉能遍知。承事如来，了知味性，非空非有，非即身心，非离身心，分别味因，从是开悟。蒙佛如来印我昆季药王、药上二菩萨名，今于会中为法王子。因味觉明，位登菩萨。佛问圆通，如我所证，味因为上。”
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